Tiazolylblått CAS 298-93-1

Shaanxi BLOOM Tech Co., Ltd. är en av de mest erfarna tillverkarna och leverantörerna av tiazolylblått cas 298-93-1 i Kina. Välkommen till grossist bulk högkvalitativ tiazolylblå cas 298-93-1 till salu här från vår fabrik. Bra service och rimliga priser finns.

Tiazolylblått, mer känd som MTT (3-(4,5-dimetyltiazol-2-yl)-2,5-difenyltetrazoliumbromid), har en fascinerande dualitet – det är både ett viktigt verktyg inom cellbiologi och en kameleonisk kemisk egendom. Detta gula kristallina pulver genomgår en häpnadsväckande metamorfos i levande celler: mitokondriella reduktaser klyver dess tetrazoliumring och omvandlar den till en olöslig lila formazanfällning - en reaktion som är så visuellt slående att den har blivit guldstandarden för att mäta cellviabilitet. Men bortom labbbänken avslöjar MTT mer esoteriska beteenden; dess kristallina struktur bildar märkliga "fiskbensmönster" under mikroskopi, medan dess redoxegenskaper gör att den kan delta i exotiska fotokemiska reaktioner när den utsätts för specifika våglängder av ljus. Märkligt nog uppvisar föreningen ett sällsynt fenomen som kallas "metakromasi" - uppträder i olika färger beroende på koncentration och molekylär miljö - en egenskap som en gång utnyttjades av textilkemister för att skapa "smarta" färgämnen. Nyligen genomförda studier har avslöjat dess oväntade roll som en svag hämmare av vissa respiratoriska kedjeenzymer, vilket antyder att detta allestädes närvarande analysreagens kan ha subtilt påverkat själva metaboliska processer som forskare använder det för att studera. När de löses i organiska lösningsmedel visar MTT-lösningar en ovanlig fluorescensdämpande effekt som har förbryllat fysikaliska kemister, vilket tyder på komplexa intermolekylära interaktioner som fortfarande väntar på fullständig förklaring.

Tiazolylblått,Det kemiska namnet är 3-(4,5-dimetyl-2-tiazol)-2,5-difenyltetrazoliumbromid, förkortat MTT, vilket är en viktig organisk förening. Sedan Mosman först rapporterade användningen av MTT-färgning för att bestämma celltillväxt och överlevnad 1983, har MTT använts i stor utsträckning inom områden som biovetenskap, medicinsk forskning och läkemedelsutveckling. Följande är en detaljerad förklaring av dess syfte:

Tillämpning inom cellbiologisk forskning

 

MTT är en av de klassiska metoderna för att bestämma cellproliferation. Under cellodling kan dehydrogenaser som succinatdehydrogenas i levande cellmitokondrier reducera exogen MTT till olösligt blålila kristallint formazan, som avsätts i cellen. Döda celler saknar denna reducerande förmåga och producerar därför inte formazan. Genom att lösa formazan i celler och mäta dess ljusabsorptionsvärde vid specifika våglängder (som 490nm eller 562nm) med hjälp av en enzym-länkad immunosorbentanalys (ELISA)-läsare, kan antalet levande celler reflekteras indirekt. Inom ett visst intervall av cellantal är mängden MTT-kristaller som bildas proportionell mot antalet celler, så cellproliferation kan bestämmas baserat på det uppmätta absorbansvärdet (OD-värde).

Tillämpning inom cellbiologisk forskning

 

MTT kan också användas för att bestämma toxiciteten hos läkemedel eller andra behandlingsmetoder (som strålbestrålning) på odlade celler in vitro. Genom att jämföra OD-värdena för behandlingsgruppen och kontrollgruppen kan effekten av läkemedel eller behandlingsmetoder på cellaktivitet utvärderas. Ju högre OD-värdet är, desto starkare cellaktivitet; Tvärtom indikerar det att ju svagare cellaktivitet eller desto större celltoxicitet. Denna metod har breda tillämpningar inom läkemedelsscreening, toxikologisk forskning och andra områden. Även om MTT huvudsakligen används för att mäta cellproliferation och cytotoxicitet, kan det i vissa fall också användas för att hjälpa till vid studiet av cellapoptos. Under processen med cellapoptos förändras enzymaktiviteten inuti cellen, vilket kan påverka den reducerande förmågan hos MTT. Genom att jämföra skillnaden i OD-värden mellan apoptotiska celler och normala celler kan förekomsten av cellapoptos preliminärt bestämmas. Det bör dock noteras att MTT inte är en specialiserad metod för att detektera cellapoptos, och dess resultat måste analyseras omfattande i samband med andra metoder för apoptosdetektion.

Applikation i läkemedelsutveckling

 

I processen för läkemedelsutveckling är MTT-analys en vanlig metod för screening av läkemedel med hög-genomströmning. Genom att saminkubera testläkemedlet med celler och använda MTT-analys för att mäta förändringar i cellaktivitet, kan potentiella aktiva läkemedelsmolekyler snabbt screenas. Denna metod har fördelarna med enkel användning, tillförlitliga resultat och hög genomströmning, och har ett viktigt tillämpningsvärde i ett tidigt skede av läkemedelsutveckling. MTT-analysen kan också användas för att studera läkemedels verkningsmekanism. Genom att jämföra förändringarna i cellaktivitet under olika läkemedelsbehandlingsförhållanden kan läkemedels inverkan på processer som cellproliferation och apoptos preliminärt bestämmas. Genom att kombinera andra molekylärbiologiska tekniker såsom Western blot och flödescytometri, kan målen och signalvägarna för läkemedel avslöjas ytterligare. I läkemedelssäkerhetsutvärdering kan MTT-analys användas för att bedöma läkemedels toxiska effekter på celler. Genom att mäta OD-värdesförändringarna hos celler efter läkemedelsbehandling är det möjligt att avgöra om läkemedlet har cytotoxicitet och styrkan av toxicitet. Detta är av stor betydelse för att vägleda preklinisk forskning och klinisk tillämpning av läkemedel.

Tillämpningen av MTT inom andra områden

 

I immunologisk forskning kan MTT-analys användas för att bestämma lymfocyternas proliferationsförmåga. Genom att saminkubera lymfocyter med antigener eller immunstimulerande medel och mäta förändringar i cellaktivitet med MTT-analys, kan lymfocyternas immunsvarsförmåga utvärderas. Denna metod har breda tillämpningar inom vaccinutveckling, immunterapi och andra områden. Inom onkologisk forskning kan MTT-analys användas för att bestämma proliferationsaktiviteten och läkemedelskänsligheten hos tumörceller. Genom att jämföra förändringarna i OD-värden för tumörceller under olika läkemedelsbehandlingsförhållanden kan läkemedelsmolekyler med hämmande effekter på tumörceller screenas och deras anti-tumöreffekter kan utvärderas. Detta är av stor betydelse för att vägleda den kliniska behandlingen av tumörer. Inom miljötoxikologisk forskning kan MTT-analys användas för att utvärdera de toxiska effekterna av miljöföroreningar på celler. Genom att saminkubera celler med olika koncentrationer av föroreningar och mäta förändringar i cellaktivitet med hjälp av MTT-analys, kan toxiciteten och verkningsmekanismen för föroreningar bestämmas. Detta är av stor betydelse för att bedöma de ekologiska riskerna med miljöföroreningar och utforma miljöskyddspolicyer. 

Experimentella steg avtiazolylblåttmetod:

1: Trypsin smälter celler i logaritmisk fas, centrifugerar och samlar upp dem efter avslutning för att göra cellsuspension och justerar dess koncentration till 5-10 genom cellantal × 104/ml. För nybörjare är det nödvändigt att få cellerna att nå 5-10 × 104/ml vet ofta inte var de ska börja. Jag är här för att ge dig en enkel metod för att initialt bestämma antalet celler.

Ta 25 cm2 som vanligtvis används för cellodling som ett exempel:

1) Celldensiteten är cirka 80%~90% (figuren nedan visar det ungefärliga tillståndet för celler vid 80%~90% densitet). Efter digestion och centrifugering, ta bort supernatanten och tillsätt 3 ml medium för att blanda den.

2) Ta ett nytt 15 ml sterilt centrifugrör (för nästa steg av inokulering av 96-brunnars platta) och fyll det med cirka 9 ml medium

3) Ta 1 ml från 3 ml cellsuspensionen som bereddes i det första steget, tillsätt den i det övre röret och räkna cellerna efter blandning. Vid denna tidpunkt är det i allmänhet 5-10 eller mindre × 104/ml, vilket motsvarar 5-10 celler per cell i 4 celler på cellräkningstavlan (se figuren nedan); Om koncentrationen inte räcker till ska cellsuspensionen tillsättas enligt räkneresultatet och varje droppe ska beräknas som 50 ul.

4) Antalet celler bör justeras enligt de olika syftena med experimentet. Till exempel, i ett allmänt cellproliferationsexperiment, kan 2000 celler per brunn användas (motsvarande cellsuspensionstäthet på 2 × 104/ml), 5000 till 10000 celler per brunn (motsvarande cellsuspensionstäthet på 5 × 104/ml). Dessutom bör antalet celler också bestämmas enligt deras egna egenskaper, såsom tillväxthastighet. Till exempel kan tätheten av celler som växer snabbare vara något mindre.

2. Efter beredning av cellsuspensionen, blanda den försiktigt och tillsätt 100 ul i varje hål, så att densiteten för cellerna som ska testas är 5000-10000/hål (kanthålet är fyllt med steril PBS).

L Notera: Eftersom cellerna kommer att fortsätta att sedimentera efter blandning, är det nödvändigt att blanda upprepade gånger under inokuleringsprocessen, som att blanda en gång vart sjätte hål, för att säkerställa att celltätheten för inokuleringen är exakt densamma mellan hålen, vilket är avgörande för resultaten av MTT.

3. Sätt den inokulerade cellodlingsplattan i inkubatorn för odling tills cellmonoskiktet är täckt med botten av hålet (96-håls platt platta), och tillsätt läkemedlet med koncentrationsgradient. I princip kan läkemedlet tillsättas efter att cellen fästs på väggen, eller två timmar, eller en halv dag, men vi lägger ofta till läkemedlet på eftermiddagen föregående dag och nästa morgon. Generellt sätts 5-7 lutningar, 100 ul per hål och 3-5 flera hål. Det rekommenderas att ställa in 6, annars är det svårt att spegla den verkliga situationen. Följande figur kan användas som referenssteg för 96-hålsplatta.

L För dosering lägger vissa personer direkt till läkemedel i 96-brunnars plattor i olika volymer för att bilda en koncentrationsgradient. Men jag tycker att vi ska försöka blanda olika koncentrationer av läkemedel i EP-röret, sedan ta bort odlingssupernatanten från 96-brunnars plattan (som kan sugas bort med en urladdningspistol) och tillsätta 100 ul odlingsmedium som innehåller olika koncentrationer av läkemedel, vilket kan säkerställa noggrannheten av läkemedelskoncentrationen. Dessutom bör det noteras att om denna metod används, sug inte all 96-brunnars plattodlingslösning innan du tillsätter medicin. Du bör lägga till prover omedelbart efter att du har sugit en del av det för att undvika celldöd på grund av torkning av plattan med 96 brunnar.

Inkubera med 4,5 % CO2 vid 37 grader i 16-48 timmar och observera effekten av läkemedlet under det inverterade mikroskopet. Följande figur visar en typisk läkemedelsgradient av cytotoxicitet.

4. Tillsätt 10 ul MTT-lösning (5 mg/ml, dvs . 0.5% MTT) till varje brunn och fortsätt att odla i 4 timmar. Om läkemedlet kan reagera medtiazolylblåttodlingslösningen kan kasseras efter centrifugering, och odlingslösningen innehållande MTT kan tillsättas efter att ha tvättats med PBS i 2-3 gånger.

5. Stoppa odlingen och förbered för upplösning och kristallisering.

Tiazolylblått, vars kinesiska namn är Methyl Blue, är en viktig organisk förening som används flitigt inom medicin, biologi och kemi. inom medicin används det ofta för att behandla nitritförgiftning, cyanidförgiftning etc., och används också vid diagnos och adjuvansbehandling av vissa sjukdomar; I biologisk forskning kan det användas som färgningsmedel för märkning av celler eller vävnader. Men som många läkemedel kan metylenblått också ha en rad biverkningar under användning:

Biverkningar av matsmältningssystemet

Illamående och kräkningar är en av de vanligaste biverkningarna av matsmältningssystemet av metylenblått. När metylenblått kommer in i kroppen kan det stimulera mag-tarmslemhinnan, orsaka illamående och till och med kräkningar i svåra fall. Detta symptom är mer uttalat när den intravenösa injektionshastigheten är för snabb eller dosen är för stor. Till exempel, i vissa kliniska fall kan patienter uppleva betydande illamående och kräkningar kort efter snabb intravenös injektion av metylenblått, vilket påverkar deras komfort och behandlingsupplevelse. Vissa patienter kan uppleva buksmärtor efter att ha använt metylenblått, och graden av smärta kan variera beroende på individuella skillnader, allt från milda obehag till svårare smärta.

Samtidigt kan det också åtföljas av diarré, vilket kan bero på störning av metylenblått på tarmens peristaltik och matsmältningsfunktion, vilket leder till onormala tarmrörelser och förändringar i matsmältningsvätskeutsöndringen.Långvarig eller frekvent förekomst av buksmärtor och diarré påverkar inte bara patientens fysiska hälsa utan absorption och absorption av näringsämnen kan också leda till andras fysiska hälsa.

Biverkningar av urinvägarna

Efter användning av metylenblått blir urinens färg blå, vilket orsakas av utsöndring av metylenblått och dess metaboliter i urinen genom njurarna. I allmänhet är denna förändring i urinfärg tillfällig och kommer inte att ha någon allvarlig inverkan på den fysiska hälsan. Men i vissa speciella fall, såsom patienter med urinvägssjukdomar, kan förändringar i urinfärgen störa diagnosen av sjukdomen, och läkare måste göra en omfattande analys baserad på andra undersökningsindikatorer. Under urinering kan vissa patienter känna en stickande känsla vid urinrörsöppningen.

 

Detta kan bero på den stimulerande effekten av metylenblått på urinrörets slemhinna, speciellt när urinkoncentrationen är hög eller urinrörets slemhinna gnuggas under urinering, blir den stickande känslan mer uttalad. Detta symptom kan orsaka visst obehag för patienter och påverka deras dagliga liv.

Neurologiska biverkningar

Yrsel och huvudvärk är vanliga neurologiska biverkningar av metylenblått. Efter att ha använt metylenblått kan patienter känna sig yr och desorienterade i huvudet, eller uppleva obehag som svullnad och smärta i huvudet. Detta symptom kan påverka patientens uppmärksamhet och tankeförmåga och minska effektiviteten i arbetet och livet. Förekomsten av yrsel och huvudvärk kan vara relaterad till effekterna av metylenblått på hjärnans blodkärl och nerver, och den specifika mekanismen behöver fortfarande forskning. I sällsynta fall kan metylenblått orsaka medvetandestörningar som dåsighet, koma, etc.

Detta beror vanligtvis på överdriven användning av metylenblått eller att patienter är överkänsliga för läkemedlet, vilket orsakar allvarlig hämning av det centrala nervsystemet. Medvetandestörningar är en allvarlig biverkning som kan äventyra patientens livssäkerhet och kräver omedelbar räddningsbehandling.

1.Vad är användningen av tiazolylblått tetrazoliumbromid?

Tiazolylblått Tetrazoliumblått (MTT) kan användas vid mätning av cellproliferation. MTT producerar en gulaktig lösning som omvandlas till mörkblått, vatten-olösligt MTT-formazan av mitokondriella dehydrogenaser från levande celler.

2. Är Thiazolyl Blue säkert att förvara?

Temperaturförhållanden: Förslut pulvret och förvara det i kylskåp vid -20 grader för frysförvaring, vilket effektivt kan förlänga hållbarheten (vanligtvis 1–2 år); för korttidsförvaring (inom 1 månad) kan den tillfälligt förvaras under 4 graders kylförhållanden.

Ljus-säker och fuktsäker-krav: MTT-pulver är ljus-känsligt och ska förvaras i bruna reagensflaskor eller genomskinliga flaskor inslagna med stanniol. Under tiden bör torkmedel (t.ex. silikagel) tillsättas för att förhindra att pulvret absorberar fukt och kakar.

3. Kommer Tiazolyl Blue färg att ändras?

När lösningen visar en blålila fällning eller mörknar i färgen indikerar det att den har oxiderats och inte kan fortsätta att användas.
Undvik att placera lösningen i rumstemperatur eller i en ljus miljö, eftersom den snabbt kan misslyckas.

Populära Taggar: thiazolyl blue cas 298-93-1, leverantörer, tillverkare, fabrik, grossist, köp, pris, bulk, till salu