IPTG-reagens CAS 367-93-1

IPTG-reagensvi fokuserar på teknologin för organisk syntes sedan 2008. Vi kan utveckla högkvalitativa-produkter, helt beroende av vårt utsökta FoU-team. IPTG, CAS 367-93-1, kemisk struktur består av isopropyl - Den består av D-tiogalaktosid- och fosfatgrupper. Bland dem, - D-tiogalaktosid är en analog av galaktos, där svavelatomen ersätter syreatomen. Denna speciella glykosidstruktur tillåter IPTG att binda till DNA och inducera genuttryck. IPTG har låg löslighet i vatten, men kan lösas bra i fysiologisk saltlösning och fosfatbuffert. Den är sur med ett pKa-värde på 4,5, vilket är relaterat till fosfatgruppen i dess molekylära struktur. Det är inte lätt att kristallisera i rent vatten, men det kan bilda kristaller i högkoncentrationslösningar eller när andra föreningar tillsätts. På grund av sin förmåga att inducera bakteriellt proteinuttryck är IPTG känsligt för vissa mikroorganismer.

Vi skäms inte över Great Chemistry! Lita inte på det orimliga priset, jämför priset i samma kvalitet.

Biosyntesmetoden förIPTG-reagensanvänder vanligtvis den katalytiska verkan av mikroorganismer eller enzymer för att omvandla galaktos till isopropylgrupp- - D-tiogalaktosid.

Galaktos som råvara

För det första är det nödvändigt att använda galaktos som råvara. Galaktos är ett socker med fem kolatomer som är allmänt närvarande i naturen och kan erhållas i form av sirap eller kristaller. Vid biosyntes omvandlas galaktos till isopropyl genom en serie enzymatiska reaktioner- - D-tiogalaktosid.

Mikrobiell kultur och galaktosmetabolism

Därefter är det nödvändigt att välja lämpliga mikroorganismer som katalysatorer, vilka vanligtvis inkluderar bakterier, jäst och mögel. Odla dessa mikroorganismer i ett odlingsmedium för att tillåta dem att växa och föröka sig under lämpliga förhållanden. Under tiden konsumeras galaktos, som ett näringsämne, av mikroorganismer och metaboliseras till den önskade mellanprodukten genom en serie enzymatiska reaktioner. Den specifika reaktionsmekanismen och kemiska ekvationen i detta steg varierar beroende på typen av mikroorganismer och odlingsförhållanden.

Isomeriseringsreaktion genererar isopropylgrupp- - D-tiogalaktosid-5 '- fosfatester

Under verkan av enzymer som produceras av mikroorganismer genomgår mellanprodukter en isomeriseringsreaktion, vilket genererar isopropylgrupper- - D-tiogalaktosid-5 '- fosfatester. Reaktionsmekanismen i detta steg är att överföra hydroxylgruppen av galaktos till uridintrifosfat, vilket genererar isopropylgruppen- - D-tiogalaktosid-5'-fosfat och uridindifosfat. Den specifika kemiska ekvationen är som följer:

(CH₂ÅH)₂CHOH-OH + C₃H₇ClN₂O₂S + UDP → (CH₂ÅH)₂CHOH-O-P(U) + C₁₀H₁₅N₅O₁₀P₂ + C₃H₇N

Avskyddande grupp genererar isopropylgrupp- - D-tiogalaktosid

Det sista steget är att ta bort skyddsgruppen från isopropylgruppen- - Omvandling av D-tiogalaktosyl-5 '- fosfatester till målprodukt isopropyl- - D-tiogalaktosid. Detta steg kräver vanligtvis användning av en syra- eller alkalilösning som en katalysator för att främja reaktionen. Den specifika kemiska ekvationen är som följer:

(CH₂ÅH)₂CHOH-O-P(U) + H₂O → (CH₂ÅH)₂CHOH-OH + P (i)

Separation och rening

Genom att använda separations- och reningstekniker såsom extraktion, adsorption, kromatografi, etc., renas målprodukten isopropyl - - D-tiogalaktosid extraherades från reaktionsblandningen. Syftet med detta steg är att ta bort orenheter och förbättra produktens renhet för att möta behoven av praktiska tillämpningar

IPTG-reagensIsopropyl- -D-tiogalaktosid, engelska namn IPTG. Som placebo-inducerare är X-gal ett kromogent substrat, som båda används för blå-vit screening. IPTG skulle kunna inducera DNA-segmentet av lac-operon i Chemicalbook-vektorn för att syntetisera det amino-terminala fragmentet av -galaktosidas, vilket skulle kunna uppnå intragenisk komplementering (komplementering) med det defekta -galaktosidaset som kodas av värdceller.

1. Beredning av biomaterial:

IPTG kan användas för att framställa vissa biomaterial, såsom polysackarider, liposomer, etc. Genom att binda till specifika cellmembran eller proteiner kan IPTG främja specifika fysiologiska funktioner hos celler eller vävnader, vilket ger nya forskningsverktyg och terapeutiska strategier för området biomedicinsk ingenjörskonst. Till exempel, genom att använda IPTG som en inducerare, kan det främja uttrycket och utsöndringen av målproteiner i tekniska bakterier eller jästceller, som kan användas för att producera biomaterial med specifika funktioner.

 

Dessa biomaterial kan innefatta polysackarider, liposomer, proteinkomplex, etc.
I processen att förbereda biomaterial kan användningen av IPTG förenkla produktionsprocessen, förbättra produktionseffektiviteten och minska produktionskostnaderna. Samtidigt kan exakt reglering av målproteinexpressionsnivåer och biomaterialegenskaper uppnås genom att kontrollera mängden och varaktigheten av IPTG-tillsats.

2. Drogscreening:

 

IPTG används huvudsakligen i läkemedelsscreening för att inducera uttryck av målgener och screena uttrycksprodukter av målgener. Specifikt kan IPTG fungera som en inducerare av laktosoperoner genom att binda till lac|produkter som orsakar konformationsförändringar av lac|produkter bort från lacO, vilket aktiverar transkription och uppnår högt uttryck av målgenen. Under den blåvita screeningsprocessen induceras transformanter utan rekombinanta plasmider av IPTG för att bilda blå kolonier i närvaro av kromogent substrat X-gal.

När främmande fragment sätts in förloras de resulterande peptidfragmenten. Komplementär förmåga: Transformerade rekombinanter som innehåller rekombinanta plasmider kan endast bilda vita Escherichia coli på kromogent induktionsmedium. Denna metod för läkemedelsscreening baserad på färgförändringar spelar en viktig roll för att studera proteiner relaterade till specifika sjukdomar och söka efter nya läkemedelsmål.

3. Genetisk forskning:

 

IPTG används ofta som ett molekylärt verktyg i genetisk forskning. Genom att binda till en specifik gensekvens kan IPTG reglera uttrycksnivån för den genen och därigenom studera dess samband med specifika fenotyper eller sjukdomar.
Inom genetisk forskning används IPTG främst som inducerare och kan simulera induktionseffekten av laktos på laktas. Det används vanligtvis för att inducera uttryck av exogena gener, särskilt inom molekylärbiologi och genteknikforskning.
När man använder IPTG binder den till målgener i uttrycksvärdar som Escherichia coli. Genom att konstruera målgenen med lämpliga promotorer och regulatoriska element i expressionsvektorn kan den producera proteiner i Escherichia coli-celler. Denna inducerade effekt är av stor betydelse för att studera genfunktion, proteininteraktioner och utveckling av nya läkemedel och biomaterial.

Dessutom kan IPTG också användas som en inducerare i proteinkristallisationsexperiment för att främja proteinkristallisation. Dess verkningsmekanism är att ändra konformationen av proteiner genom att binda till hydrofoba regioner i proteiner, och därigenom främja aggregation och kristallisation mellan proteinmolekyler.

Denna aggregerings- och kristallisationsprocess är reversibel, så proteinkristallisation kan induceras genom att tillsätta IPTG, eller så kan proteinkristaller lösas genom att ta bort IPTG.

4. Jordbruksanvändning:

 

I jordbrukstillämpningar,IPTG-reagenssom en ny typ av biobekämpningsmedel, har herbicidspecifika effekter. Det kan störa den normala metabolismen av galaktos i växter och därigenom påverka deras normala tillväxt. Denna interferensmetod är känsligare för vissa ogräs, så att använda IPTG kan effektivt ta bort ogräs utan att skada grödor. Samtidigt, eftersom IPTG är en ny typ av biobekämpningsmedel, har den bättre miljövänlighet och högre säkerhet för människor och djur jämfört med traditionella kemiska bekämpningsmedel. Därför har IPTG breda tillämpningsmöjligheter inom jordbrukstillämpningar.

Potentiell interferens med reglering av genuttryck

 

Icke specifik induktion

IPTG, som en inducerare, har en viss specificitet i sin verkan, men icke-specifik induktion kan förekomma i vissa fall. IPTG inducerar inte bara uttrycket av målgener, utan kan också påverka uttrycket av andra gener i celler. Detta kan bero på det faktum att efter att IPTG binder till repressorproteinet ändrar det repressorproteinets konformation och funktion, vilket gör att det har vissa effekter på andra operoner, och därigenom lindrar hämningen av icke-målgenexpression.

Icke-specifik induktion kan leda till förändringar i intracellulära proteinuttrycksprofiler, vilket producerar oväntade proteiner som inte bara stör analysen och bedömningen av experimentella resultat, utan kan också ha negativa effekter på cellers normala fysiologiska funktioner. Till exempel, i vissa proteinexpressionsexperiment, efter induktion med IPTG, fann man, förutom att detektera en ökning av uttrycket av målproteinet, även uppreglering av uttrycket av några andra okända proteiner. Dessa icke-specifika uttryckta proteiner kan störa reningen och funktionella studier av målproteinet.

Irreversibilitet av inducerat uttryck

Under normala omständigheter, efter att induceraren tagits bort, bör genuttrycket återgå till dess nivå före induktion. Studier har dock visat att IPTG-inducerat genuttryck kan ha en viss grad av irreversibilitet. När väl IPTG används för att inducera genuttryck, även om IPTG tas bort, kan genuttrycksnivån fortfarande förbli på en hög nivå och kan inte återställas till baslinjenivån före induktion.

Denna irreversibilitet kan bero på -långsiktiga intracellulära förändringar inducerade av IPTG, såsom förändringar i kromatinstruktur och modifieringar av transkriptionsfaktorer, som upprätthåller en hög nivå av gentranskriptionell aktivitet. Irreversibiliteten av inducerat uttryck kan orsaka stora svårigheter i experiment, särskilt i experiment som kräver exakt reglering av genuttrycksnivåer, vilket kan leda till felaktiga och icke reproducerbara experimentella resultat.

Baserat på sin stabila molekylära struktur och pålitliga inducerande aktivitet har IPTG blivit ett oumbärligt reagens i molekylärbiologiska laboratorier över hela världen. Det används ofta i rekombinant proteinuttryck, genfunktionsforskning och mikrobiella ingenjörsexperiment, vilket ger stabila induktionseffekter för vetenskaplig forskning och industriell produktion. Vårt långsiktiga fokus på organisk syntesteknologi och strikta kvalitetskontroll säkerställer att våra IPTG-produkter bibehåller hög renhet, stabilitet och konsistens, vilket effektivt uppfyller de krävande kraven från vetenskapliga experiment och industriella tillämpningar.

Med stöd av ett professionellt FoU-team fortsätter vi att optimera syntesprocesser och förbättra produktprestanda för att bättre betjäna globala forskare och tillverkare. Med sin tydliga verkningsmekanism, stabila egenskaper och breda tillämpbarhet kommer IPTG att förbli ett kärnreagens inom biovetenskaplig forskning, och vi kommer att fortsätta att tillhandahålla högkvalitativa-produkter och professionellt tekniskt stöd för utvecklingen av bioteknik.

Populära Taggar: iptg reagent cas 367-93-1, leverantörer, tillverkare, fabrik, grossist, köp, pris, bulk, till salu